第186章 改進發酵方案

  第二天一早他們按照劉斌以前的實方案繼續實驗，秦奮主要是協助並學習相關的操作。他首先在無菌操作台挑出菌落接種在小管內37℃小轉速培養（挑取的是大片的，秦奮沒有打斷他的操作）。接種好以後直接放在搖床200轉/分鍾約2小時，然後接種在10升三角瓶內200轉/分鍾大轉速繼續培養24小時。24小時後測定單位菌落數值，達到一定的數值後，移入小型發酵罐去培養，產酶。酶液發酵需要特定的培養基，培養基都是提前配置好各種比例的鉀鹽、鈉鹽等無機物跟菌株生長所需要的有機物。發酵罐24小時後測定單位酶活性，達到最大值後將發酵液取出，處理後冷凍備用，大概的流程就是這樣的。每天秦奮跟劉斌重複著相同的工作過了半個多月，單位酶活力還是跟之前一樣，沒有變化。期間秦奮也要來了劉斌參考的文獻認真的學習。


  “劉斌，你們就一直按照你這段時間的操作沒有優化過嗎？”秦奮問道


  “這都是我們優化好的了”


  “那為什麽酶活力就是達不到呢？”


  “這個我也不清楚，反正我也很努力了就是沒什麽改變”


  “我也查看了你發來的一些文獻，有幾點我覺得是可以改善一下的”


  “哦。你說說看”


  “1.我以前做實驗的時候都是挑取的單菌落，可以你在挑取的時候都是一群菌落都呼啦啦的全拉進去了”


  “這有什麽區別嗎？我們都是這麽做的呀”


  “我認為單菌落跟多個菌落還是有區別的—單菌落你在培養的時候他不斷地分裂、增殖，擴增後的所有的菌落生長速度、生長狀況無論在何時是不是都在同一水平？你如果一開始就挑取不同的菌落，他們個體生長狀態本就不一致，擴增後的菌落會不會各不相同？”


  “嗯，好像也有點道理”李斌將信將疑的點頭

  “2.挑取的菌落放在搖床上培養的時候，我以前做實驗都是先小轉速比如60轉/分鍾培養30分鍾後再轉換大轉速繼續培養，也是隔一段時間測定他的OD值。你的操作是直接大轉速培養”


  “這有啥卻別嗎？文獻中沒有說先小轉速啊，都是寫著200轉/分鍾”劉斌問道


  “對，文獻上肯定沒有這麽寫，這都是我在實驗室的時候師兄、師姐他們在做實驗的時候的經驗傳承”


  “3.關於菌株培養基的PH值，有的文獻上是5.3有的文獻上是6.2這個差距還是比較大的，你在操作的時候我發現你並沒有關注這一點，有時候PH高一點、有時候低一點，我覺得最好是做一個5-6.5之間分幾個值：比如PH5、PH5.5、PH6、PH6.5，在其他因素不變的情況下看看哪一個PH值酶活性最好，在以後的實驗中就固定此PH值”